- 进入细胞间时必须穿戴整齐细胞间内的实验服，更换鞋子或带上鞋套，更换口罩、手套，无论进入细胞室的时间多短，甚至是只进来开关紫外灯。
- 接触细胞室内的东西时都需要佩戴手套，佩戴手套时减少与手套外表面与皮肤接触，如接触需要先在手套外表面喷洒酒精抹匀后再进行操作。
- 每次需要使用细胞间时都需要提前0.5-1个小时将细胞室和洁净工作台紫外照射0.5-1小时。
- 任何进入细胞间的物品都需要用酒精或者支原体去除液仔细擦拭物品的外表面，除不能进行紫外灭菌的质粒、抗生素之类外其他物品都需要紫外照射0.5-1小时后方可使用。
- 如有条件，从细胞间物品存放的外室进入操作的内室时需要更换手套。
- 进入细胞间使用的耗材物品必须为无菌或者细胞级的耗材，整袋的离心管、培养瓶、手套都不能在外面开封过。
- 进入细胞间进行操作时，确保细胞间内的通风已打开。
- 细胞间内的物品（包括装有细胞的培养瓶）在放入洁净工作台使用前都需要拿酒精或者支原体去除液喷洒外表面再放入使用。
- 洁净工作台的操作都需要在酒精灯的附近完成操作，既不要离酒精灯太近以免烫伤或是损伤细胞，也不能离的太远失去酒精灯附近操作的效果。
- 双手重新进入或者第一次进入洁净工作台操作时需要涂抹酒精，同时操作范围需要在通风口的里侧操作。
- 打开试剂瓶盖时或者EP管时不要接触盖子的内部，将盖子反转过来口朝上置于洁净工作台内，同时特别注意手不能从任何敞口的容器或是盖子上通过，敞口的离心管之间在相邻的试管架上放置时也要避免口之间的相互触碰。
- 打开或者重新合上试剂的盖子时，瓶子的管口和盖子都需要在酒精灯火焰上短暂通过，需要在都灼烧到整个管口的同时降低火焰上通过的时间，长时间在火焰上容易造成管口和盖子变形。
- 使用试剂时要避免摇晃使得瓶口沾上液体，特别是含培养基的液体，不然容易造成污染。
- 吸取和加入液体时管子应该倾斜，避免手处于敞口容器的上方。
- 使用移液管或是滴管时，撕开的口子要合适，要避免滴管或者移液管的管口在取出的时候会接触到撕开的部分。
- 使用的枪头、滴管、移液管在添加不同的溶液时必须要进行更换。
- 使用的枪头、滴管、移液管的管口接触了非你所需加入液体的表面时也必须进行更换。
- 同一时间细胞间内只操作一种细胞，防止出现细胞的交叉污染。
- 操作完成后需要仔细擦拭洁净工作台并照射紫外并确保关闭所有仪器。
- 注意CO2培养箱中的温度和CO2浓度；CO2气瓶压力变小时需要及时调节和更换气瓶。
- 掉落在地面的物品不管是什么一律废弃。
操作层面上肯定还要很多具体的细节我无法列出，但是无菌操作中最重要的原则就是你发现了你出现了操作失误，不应该抱有侥幸的心理，要及时的废弃操作失误的试剂和物品，因为污染带来的影响和后续的麻烦远远比现在废弃一些试剂和增加一些工作量要麻烦的多。
标签：管口,需要,工作台,细胞,手套,无菌,注意事项,操作 来源： https://blog.csdn.net/weixin_40270911/article/details/120855823
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